Imunologické vyšetrenie krvi v kontexte IVF: Kľúč k porozumeniu neplodnosti

Neplodnosť, definovaná ako neschopnosť otehotnieť po roku pravidelného nechráneného pohlavného styku, je problémom, ktorý postihuje až 1 zo 6 párov. U žien nad 32 rokov sa odporúča základné vyšetrenie páru už po pol roku snaženia sa o dieťa. Problémy s plodnosťou sa stávajú čoraz bežnejšie, a preto je dôležité venovať pozornosť diagnostike a možnostiam liečby. Jednou z metód asistovanej reprodukcie je mimotelové oplodnenie (IVF). Dôležitou súčasťou diagnostického procesu pred IVF je aj imunologické vyšetrenie krvi, ktoré môže odhaliť skryté príčiny neplodnosti. Tento článok poskytuje komplexný prehľad o imunologickom vyšetrení krvi v kontexte IVF, jeho význame, indikáciách a interpretácii výsledkov.

Diagnostika neplodnosti: Kľúč k úspešnej liečbe

Diagnostika príčin neplodnosti je kľúčová pre správne zvolenú liečbu. Preto je nevyhnutné vyšetriť oboch partnerov. Na základe výsledkov základných vyšetrení lekár rozhodne, či sú potrebné aj špeciálne vyšetrenia. Hodnotenie stavu plodnosti partnerského páru je postupný proces. Podrobné hodnotenie a vyšetrenie oboch partnerov prispieva k odhaleniu príčiny neplodnosti a k následnej úspešnej liečbe. Niektoré prípady sú na diagnostiku veľmi jednoduché, iné vyžadujú náročnejšie vyšetrenia.

Základné vyšetrenia u žien

Vstupná konzultácia a anamnéza: Lekár sa zameriava na priebeh menštruačného cyklu, prekonané ochorenia, vykonané vyšetrenia a predchádzajúcu liečbu. Zaujímajú nás ich zdravotné ťažkosti a diagnózy, úmrtia, opakované potraty a iné závažné informácie.

Základné gynekologické vyšetrenie: Jedná sa o ultrazvuk maternice a vaječníkov s ohľadom na fázu menštruačného cyklu a následné palpačné gynekologické vyšetrenie. Vyšetrením sa posudzuje veľkosť a tvar maternice, prítomnosť svalových uzlov (myómov), výška a kvalita sliznice maternice.

Hormonálny profil: Vyšetrenie hormonálnych hladín z krvi sa vykonáva v troch fázach cyklu: 2. - 5. deň, 13. - 15. deň a 22. - 25. deň. Na základe výsledkov hormonálneho profilu, AMH a veku ženy je zvolený dlhý alebo krátky stimulačný protokol a vhodná kombinácia stimulačných preparátov. Jedná sa o vyšetrenie krvi v období 1. - 3. dňa menštruácie. Vyšetrujú sa hladiny folikulostimulačného hormónu (FSH) a luteinizačného hormónu (LH). Možno stanoviť aj hladinu Anti-Mülleriánského hormónu (AMH), ktorý informuje o zásobe vajíčok. Vek a AMH v kombinácii s AFC poskytujú komplexnú informáciu o pravdepodobnosti otehotnenia. Mali by byť vyhodnotené v úvodnej fáze diagnostiky, ešte pred zahájením liečby neplodnosti. Anti-Millerianov hormón (AMH) informuje o zásobe vajíčok. Vyšetrenie AFC (Antral follicule count) stanovuje počet antrálnych folikulov veľkosti 2 - 10 mm, ktoré sú počítané pri ultrazvukovom vyšetrení. Porucha zrenia vajíčok súvisiacich s vekom je teda jednou z najčastejších príčin ženskej neplodnosti.

Ultrazvukové vyšetrenie: Toto vyšetrenie podáva informácie o stave vaječníkov a ich schopnosti tvoriť zrelé vajíčka a dáva možné odpovede na stimulačné lieky.

Odber krvi a ster z pošvy a krčku: Slúži na vylúčenie zápalových a infekčných ochorení.

Doplnkové vyšetrenia u žien

Ultrazvuková diagnostika priechodnosti vajíčkovodov (HyCoSy): Toto základné vyšetrenie zisťuje priechodnosť či nepriechodnosť vajcovodov a zobrazuje tvar dutiny maternice. Ultrazvukové vyšetrenie priechodnosti vajíčkovodov (HyCoSy) sa realizuje ambulantne bez anestézie. Do krčka maternice sa zavedie tenký katéter, cez ktorý sa aplikuje kontrastná látka viditeľná na ultrazvuku.

Laparoskopia: Štandardom je laparoskopické vyšetrenie, ktoré sa realizuje v celkovej anestézii. Do bruška sa zavedie špeciálny optický prístroj a operatér priamo vidí ako vyzerajú reprodukčné orgány, súčasne vie aj vylúčiť prítomnosť endometriózy a myómov. Umožní posúdiť stav a funkciu vnútorných pohlavných orgánov a v prípade potreby odstrániť zrasty, ložiská endometriózy atď.

Hysteroskopia: Slúži na posúdenie stavu dutiny maternice, sliznice maternice, ústia vajíčkovodov.

Postkoitálny test: Posúdenie kvality hlienu krčka maternice, množstva a pohyblivosti spermií po normálnom pohlavnom styku. Postkoitálny test je vyšetrenie hlienu odobratého z krčka maternice po nechránenom pohlavnom styku. Robí sa v čase ovulácie, kedy má hlien optimálne vlastnosti na preniknutie spermie. Hlien sa vyšetruje ihneď po odobratí pod mikroskopom.

Genetické vyšetrenie: Vyšetrenie chromozómov, ktoré dáva informáciu o genetickej výbave partnerov. Stanovenie karyotypu (počtu chromozómov) sa vykonáva u žien po opakovaných spontánnych potratoch, alebo v prípade opakovaných neúspechov liečby metódou IVF. Genetické vyšetrenie sa vykonáva pri podozrení na geneticky podmienené poruchy plodnosti. Lekársky genetik preštuduje dostupnú zdravotnú dokumentáciu, podľa potreby realizujeme klinické vyšetrenie - výška, váha, tvar hlavy, očí, ušníc, nosa a iné odchýlky od normálu. Podľa zistených informácií navrhne pacientovi konkrétne genetické laboratórne vyšetrenie. Pacient je tým informovaný a vyzvaný podpísať Informovaný súhlas s odporúčanými vyšetreniami a postupmi. Lekár alebo sestra podľa veku odoberie vzorku krvi. Po ukončení genetických laboratórnych vyšetrení (podľa typu vyšetrenia od niekoľkých dní až po niekoľko mesiacov) je pacient pozvaný do ambulanci na ich vyhodnotenie. U párov, ktoré majú problém s počatím, sa často vyskytujú štrukturálne chromozómové chyby. Tie môžeme odhaliť pomôcť genetického vyšetrenia. Stanovenie karyotypu je základným genetickým vyšetrením, ktorým u nás prejde každý pár. Je určená pre páry, kde je dokázané riziko prenosu závažného genetického ochorenia.

Imunologické vyšetrenie: Imunologickým vyšetrením sa zisťuje prítomnosť protilátok proti spermiám, vajíčkam a embryám a antifosfolipidové protilátky. Vyšetrujú sa protilátky proti spermiám, proti trofoblastu (placente) a proti obalu embrya (zona pellucida).

Psychologické a sexuologické vyšetrenie: Pri ťažkostiach pri pohlavnom styku, psychoreaktívnych poruchách a pod.

Základné vyšetrenia u mužov

Spermiogram: Mikroskopické vyšetrenie vzorky ejakulátu, ktorým stanovujeme jeho objem; počet a morfológiu spermií, podiel a kvalitu ich pohybu, prítomnosť ďalších buniek. U nás je potrebné dodržať 2-7 dňovú sexuálnu abstinenciu na základné vyšetrenie ejakulátu. Na základné vyšetrenie ejakulátu môžete prísť bez objednania v pracovných dňoch medzi 7.30-13.00. Zabezpečená je absolútna intimita a v prípade požiadavky prítomnosť partnerky. Vykonávame základné a rozšírené vyšetrenia spermiogramu. Výsledok vyšetrenia obdržíte do siedmich pracovných dní. Zdravotné poisťovne tento výkon neuhrádzajú. Pred plánovaným vyšetrením sa odporúča dodržať 3 dňovú pohlavnú abstinenciu, aby bola kvalita spermií optimálna. Úplne možno vylúčiť šancu na oplodnenie jedine vtedy, keď v ejakuláte žiadne spermie nie sú. Inak nemožno určiť hranicu, kedy už spontánne otehotnenie možné nie je.

Odber krvi: Na vylúčenie zápalových a infekčných ochorení.

Doplnkové vyšetrenia u mužov

Urologické vyšetrenie: Pri zápalových ochoreniach alebo po úrazoch pohlavných orgánov.

Genetické vyšetrenie: Pri podozrení na geneticky podmienené poruchy plodnosti, pri ťažších poruchách spermiogramu, pred chirurgickým zákrokom na semenníkoch alebo nadsemenníkoch.

Hormonálny profil: Pri ťažších poruchách spermiogramu.

Psychologické a sexuologické vyšetrenie: Pri impotencii, nedostatočnej erekcii, chýbajúcej ejakulácii a pod.

Test integrity DNA spermií, pri ktorom sa zisťuje prítomnosť spermií s poškodenou genetickou výbavou.

Imunologické vyšetrenie krvi: Prečo je dôležité pri IVF?

Imunologické vyšetrenie je významné pre páry, kedy pacientka, u ktorej bol opakovane vykonaný embryotransfer veľmi kvalitných embryí a kde je liečba, cez veľmi dobré podmienky, stále neúspešná. Vyšetrenie by mala podstúpiť aj pacientka s opakovanými neúspechmi liečby metódou IUI, kedy je u partnera opakovane vyšetrený spermiogram úplne normálny. Niektoré páry môžu mať imunologické príčiny neplodnosti, preto je aj toto vyšetrenie dôležité a pomôže nám v stanovení ďalšieho postupu.

Nesprávna funkcia imunitného systému môže byť problémom na ceste za vytúženým bábätkom. Imunologický systém zohráva dôležitú úlohu pri počatí a donosení zdravého plodu. Jeho porucha môže byť jednou z príčin neplodnosti páru. Vyšetrenie u imunológa absolvujú obaja partneri. Po zosumarizovaní všetkých absolvovaných vyšetrení a po konzultácii s lekárom z nášho centra, imunológ stanoví diagnózu a navrhne individuálny liečebný postup.

Typy imunologických vyšetrení a ich význam

• Protilátky proti spermiám: V prípade vysokého percenta nepohyblivých spermií môžu byť na príčine prítomné protilátky proti spermiám, ktoré spôsobujú ich znehybnenie prípadne zhlukovanie. V laboratóriu oddelenia klinickej imunológie a alergológie - MEDIREX a.s. v Bratislave sa vyšetruje stav bunkovej imunity, protilátky proti spermiám.
• Protilátky proti vajíčkam: V laboratóriu oddelenia klinickej imunológie a alergológie - MEDIREX a.s. v Bratislave sa vyšetruje stav bunkovej imunity, protilátky proti ovariám.
• Protilátky proti embryám: Tieto protilátky môžu priamo brániť uhniezdeniu embrya v maternici.
• Antifosfolipidové protilátky: Ako jedno z mála laboratórií sa venujeme tiež diagnostike antifosfolipidového syndrómu s postupne sa rozširujúcou paletou protilátok. Tieto protilátky môžu spôsobovať problémy so zrážanlivosťou krvi, čo môže viesť k potratom.

V našom laboratóriu ponúkame metódy, ktoré sú odporúčané vo vyššie spomínanom „Návrhu doporučení pro stanovení parametru protilátkové a buněčné imunity u žen a mužů s poruchami plodnosti“, ako aj niektoré iné parametre, u ktorých sa ukazuje, že majú v tejto problematike význam:

Ženy:

• Bunková imunita
• Intracelulárne cytokíny
• Skríning systémových autoimunitných ochorení
• Skríning celiakie
• Antifosfolipidový syndróm
• Vitamín D
• Protilátky proti spermiám, zona pellucida, ováriám

Muži:

• Kvalita ejakulátu (množstvo a vitalita spermií, prítomnosť leukocytov, prítomnosť intraakrozomálneho proteínu)
• Protilátky proti spermiám (viazané) v ejakuláte
• Protilátky proti spermiám v sére
• Skríning systémových autoimunitných ochorení
• Skríning celiakie
• Vitamín D

Uterinné NK bunky a ich význam

Dôležitou súčasťou imunologickej diagnostiky je aj vyšetrenie uterinných NK buniek - špecializovaných buniek imunitného systému, ktoré sa nachádzajú v sliznici maternice. Tieto bunky zohrávajú významnú úlohu pri uhniezďovaní embrya a vývoji placenty. Ich príliš nízky alebo naopak nadmerný počet môže prispieť k opakovaným zlyhaniam implantácie či k potratom. Vyšetrenie sa vykonáva biopsiou endometria (odberom malej vzorky sliznice maternice) v presne stanovenom čase menštruačného cyklu.

Priebeh IVF a súvisiace vyšetrenia

V prípade, ak pri vstupných vyšetreniach zistíme príčiny, ktoré bránia prirodzenému otehotneniu alebo voľbe jednoduchších metód asistovanej reprodukcie, IVF špecialista odporučí páru pri konzultácii postup IVF (in vitro fertilizácie). Vašu cestu za vytúženým cieľom nepredlžujeme neefektívnymi metódami. Od samého začiatku sa priamo pre vás snažíme nájsť najúčinnejšie riešenie.

Prvým krokom je úvodná konzultácia v centre asistovanej reprodukcie. U žien ide štandardne o hormonálne, imunologické a ultrazvukové vyšetrenie. Pre podstúpenie mimotelového oplodnenia je nevyhnutné získať väčší počet zrelých vajíčok. Preto sa vaječníky stimulujú podávaním hormónov. Na základe výsledkov hormonálneho profilu, AMH a veku ženy je zvolený dlhý alebo krátky stimulačný protokol a vhodná kombinácia stimulačných preparátov. Pri pravidelných kontrolách (obvykle 5., 8., 11. deň stimulácie) je pomocou ultrazvuku meraný počet a veľkosť folikulov a súčasne sa kontroluje hladina hormónov FSH, LH a E2 v krvi. Počas stimulácie absolvuje každá pacientka (môže aj s partnerom) pohovor s embryologičkou. Tu je pomocou ilustračných obrázkov všetko znova vysvetlené, ujasní sa napr. voľba metódy oplodnenia vajíčok (pokiaľ sa čakalo na výsledky kontrolných vyšetrení), pacienti sú poučení o nutnosti vyplnenia informovaných súhlasov, ktoré so sebou na prečítanie a vyplnenie dostanú domov. Stimulácia väčšinou trvá minimálne 11-12 dní, odber vajíčok sa teda plánuje najskôr na 13., častejšie 14. deň. V prípade potreby, napr. nerovnomerného alebo pomalého rastu folikulov, je potrebné stimuláciu predĺžiť. Posledný deň stimulácie si pacientka podľa inštrukcií večer aplikuje ukončovaciu injekciu. Potom je deň pauza a ďalší deň prichádza aj s partnerom ráno na odber vajíčok.

Po hormonálnej stimulácii nasleduje odber vajíčok, ktoré dozreli vo folikuloch. Vajíčka sa odsajú z vaječníkov (ovárií) vpichom cez pošvu pod ultrazvukovou kontrolou. Folikulárna tekutina s vajíčkami sa zbiera do skúmavky, ktorá sa odovzdáva do embryologického laboratória. Zákrok sa robí v krátkej celkovej anestézii. Odber vajíčok je jediný úkon v rámci umelého oplodnenia, ktorý sa vykonáva v krátkodobej vnútrožilovej anestézii. Trvá 5 - 15 minút a pacientka sa preberá okamžite po výkone ešte v zákrokovej miestnosti. Je potrebné, aby pacientka prišla na odber vajíčok nalačno, od polnoci nesmie nič piť ani jesť. Po zákroku zostáva ešte 2 - 2,5 hodiny sledovaná v zobúdzacej izbe.

Odber spermií najčastejšie prebieha v rovnaký deň ako mimotelové oplodnenie v tzv. odberovej miestnosti v centre asistovanej reprodukcie. V tomto čase partner odovzdá vzorku spermií (ak nepoužívame zmrazené spermie). Odber spermií prebieha ráno v rovnaký deň ako odber vajíčok. Odber spermií je možné realizovať aj mimo nášho pracoviska, k tomu je nutné vyzdvihnúť v laboratóriu sterilnú nádobku a dodržať podmienky na prepravu. Následne sa dohodne metodika oplodnenia vajíčok a ďalšie metódy, ktoré môžu zlepšiť výsledky liečby. Partnerka dostane rozpis liekov, ktoré bude užívať po odbere vajíčok celé dva týždne, až do stanovenia tehotenského hormónu v krvi.

Po úspešnom odbere vajíčok a spermií sa vajíčka oplodia v laboratóriu. Najúčinnejšou metódou pri liečbe ťažších foriem mužskej neplodnosti je metóda ICSI (intracytoplazmatická injekcia spermie do vajíčka). Ide o mechanické vpravenie jednej spermie do vajíčka pomocou mikroihly pod špeciálnym mikroskopom. Ak je na základe výsledkov spermiogramu a funkčných testov zvolené tzv. ICSI: mechanické vpravenie jednej spermie do vajíčka (oocytu) pomocou mikroihly pod špeciálnym mikroskopom pomocou mikromanipulátora. Nech už boli vajíčka oplodňované akokoľvek, nasledujúci deň po odbere vajíčok hodnotíme ich oplodnenie.

Kultivácia prebieha po odbere vajíčok, presnejšie po ich oplodnení spermiami a trvá dva až tri dni. Ďalšie informácie o priebežnom vývoji embryí následne obdrží 3. Na 5. a 6. deň vývoja embryí telefonuje pacientka, aby sa spolu s embryológom dohodla na použití kvalitných embryí.

Embryotransfer je prenos embrya do maternice, ktorý nasleduje po jeho úspešnej kultivácii v inkubátore. V prípade transferu už predtým mrazeného embrya hovoríme o tzv. kryoembryotransfere. Na 5. deň sa všetky kvalitné embryá mrazia (vitrifikujú). Na čase vykonania čerstvého transferu sa embryológ dohodne s pacientkou na 5. deň ráno. Pokiaľ sa plánuje čerstvý transfer, vykonáva sa na 5. deň. Prenos embrya do maternice sa realizuje na 3. - 6. deň od odberu vajíčok. Na embryotransfer sa pár dostaví v dohodnutom čase do centra asistovanej reprodukcie.

Tehotenský test: Desiaty až štrnásty deň po embryotransfere príde pacientka na tehotenský test (odberom krvi sa zistí hladina hormónu hCG).

Riešenie obáv a otázok

Je prirodzené, že pred podstúpením IVF a imunologického vyšetrenia máte obavy a otázky. Dôležité je komunikovať so svojim lekárom a pýtať sa na všetko, čo vás zaujíma. Nebojte sa vyjadriť svoje obavy a trvajte na tom, aby boli vaše otázky zodpovedané.

V prípade, že máte pocit, že vás lekár ignoruje, skúste mu jasne a zrozumiteľne vysvetliť svoje obavy a trvajte na tom, aby počkal na výsledky imunologického vyšetrenia predtým, ako pristúpite k embryotransferu. Vyšetrenie imunitného systému oboch partnerov sa vykonáva v prípadoch, keď vznikne podozrenie na možnú imunologickú príčinu poruchy plodnosti. K poruchám môže dochádzať jednak v tzv. humorálnej (protilátkovej), tak aj v bunkovej imunite. Na plodnosť párov majú vplyv ochorenia, ako celiakia, porucha činnosti štítnej žľazy, fosfolipidový syndróm, prekonané chronické zápalové ochorenia apod. Tieto ochorenia môžu prebiehať skryte, bez zjavných obťaží. Ale naštartujú zápalovú reakciu v organizme, a tak narušia rovnováhu imunitných mechanizmov. Tehotenstvo potrebuje navodenie tzv. imunologickej tolerancie, zápal mu škodí. Cieľom imunologického vyšetrenia je diagnostikovať príčinu nerovnováhy, tu následne vhodne liečiť a obnoviť.

Imunologické príčiny neplodnosti

Ženám so sterilitou sa nedarí spontánne otehotnieť. Hľadáme preto príčinu problémov hneď na začiatku procesu, tj. Reprodukčné protilátky, tzn. Aktivita NK buniek - kultivujeme krv pacientky spolu so stimulačnými agens-spermiami, liniiou trofoblastu a nešpecifickým silným aktivátorom a sledujeme expresiu znaku CD69 na povrchu NK a NKT buniek. Vysoká expresia aktivačných znakov po stimulácii spermiami alebo trofoblastom, svedčí o zvýšenej cytotoxickej reaktivite namierenej proti antigénom partnera/plodu a môže ovplyvniť úspešnosť počatia alebo zvýšiť riziko potratu. Produkcia cytokínov - kultivujeme krv pacientky spolu so stimulačnými agens-spermiami, líniou trofoblastu a nešpecifickým silným aktivátorom a sledujeme množstvo cytokínov vo vnútri buniek. Ženy s infertilitou otehotnenia, ale nie sú schopné donosiť a porodiť životaschopný plod. U tejto skupiny je potrebné dôkladnejšie vyšetriť, či vôbec došlo k navodeniu tolerancie k plodu, alebo či tu existuje riziko upchatia ciev mikrotrombmi.

Základné parametre, tzn. AMH (anti-müllerianský hormón) - množstvo tohto hormónu koreluje s individuálnou ovariálnou rezervou vajíčok. Aktivita NK buniek - kultivujeme krv pacientky spolu so stimulačnými agens-spermiami, líniou trofoblastu a nešpecifickým silným aktivátorom a sledujeme expresiu znaku CD69 na povrchu NK a NKT buniek. Produkcia cytokínov - kultivujeme krv pacientky spolu so stimulačnými agens-spermiami, liniu trofoblastu a nešpecifickým silným aktivátorom a sledujeme množstvo cytokínov vo vnútri buniek. U týchto žien sa spravidla ponúka panel na infertilítu.

V rámci komplexného pohľadu na danú problematiku je zásadné, aby vyšetrenie podstúpil aj muž. V imunologickom laboratóriu sú zavedené metódy stanovenia kvality spermií v ejakuláte pomocou prietokovej cytometrie. Cytometrické vyšetrenie ejakulátu je možné urobiť z tej istej vzorky ejakulátu z ktorej bol vykonaný spermiogram. Apoptóza je riadená smrť buniek. Jedná sa o prirodzený proces, pri ktorom dochádza k postupnému odumieraniu spermií, fragmentácii DNA i k zmenám na povrchu buniek. Pomer apoptotických a živých spermií, určuje kvalitu ejakulátu. V zdravom ejakuláte by malo byť viac než 50 % živých spermií a menej než 50 % spermií apoptotických. Vysoké zastúpenie apoptotických spermií je zisťované u pacientov s infekciami, autoimunitnými ochoreniami alebo patológiami v oblasti urogenitálneho traktu. Stanovenie počtu spermií s fragmentovanou DNA, vykonávame cytometricky pomocou metódy TUNEL (Terminal deoxynucleotide transferase dUTP Nick End Labelling). Do DNA spermií sa pomocou enzýmu naviaže farbička a označí poškodenú DNA. V kvalitnom ejakuláte je menej než 20 % spermií s fragmentovanou DNA. Mierne zvýšená hodnota je 20-30%. Čím viac je vo vzorke spermií s fragmentovanou DNA, tým nižšia je pravdepodobnosť úspešného oplodnenia oocytu. Ponúkame taktiež cytometrické vyšetrenie koncentrácie spermií a leukocytov v ejakuláte, stanovenie počtu spermií s nekvalitným akrozómom alebo bez akrozomálnych proteínov. Mikroskopicky vykonávame vyšetrenie prítomnosti protilátok proti spermiám. Protilátky môžu výrazne inhibovať pohyb spermií. Príčinou infertility mužov môže byť i porucha imunitného systému alebo autoimunita.

Našou snahou je „dávať veci dohromady“. Páry, ktoré majú za sebou dlhoročné martírium, keď sa snažia o vytúženého potomka, prešli množstvom vyšetrení. Často sa ale nepodarilo poskladať informácie dohromady (vyšetrenia boli vykonané na mnohých pracoviskách nezávisle na sebe) a nájsť dôvod neúspechu. Často sa liečila iba partnerka a muž „normospermik“, bol automaticky považovaný za zdravého. Tým, že sa všetky vyšetrenia vykonávajú v jednom laboratóriu a spravidla pár prichádza spoločne, máme ucelený prehľad, a je teda väčšia šanca, že nejaký dôvod objavíme.

Súbory vyšetrení sú rozdelené na základný panel, ktorý obsahuje základné screeningové vyšetrenia a kompletný panel, ktorý obsahuje detailnú analýzu množstva parametrov, vrátane funkčných testov buniek. Lekár podľa typu ochorenia odporúča vhodnú sadu testov. Pokiaľ zistíme pozitívitu v základnom paneli, odporúčame doplniť príslušnú skupinu vyšetrení. Okrem týchto tzv. „reprodukčných balíčkov“ ponúka imunologické laboratórium napr.

V akomkoľvek prípade, fyziologické tehotenstvo, ktoré je ukončené pôrodom zdravého novorodenca, je podmienené vzájomnou súhrou neuroendokrinnej sústavy a imunitného systému. Je charakterizované výraznými adaptačnými zmenami v tele matky zo জায়গা všetkých orgánových systémov. Plod, ako imunologicky cudzie tkanivo v tele matky, je chránený pred odlúčením - teda potratom, či predčasným pôrodom - mnohými mechanizmami, ako napr. vzájomným vplyvom hormónov, imunokompetentných buniek a cytokínov. Ak všetko funguje správne, žena počne, donosí a porodí zdravé dieťa. Imunitný dozor vnútri ľudského tela má mnoho povinností, ktoré možno zhrnúť do jednej podmienky - šetriť vlastné zdravé tkanivá a zároveň napádať a odstraňovať všetko ostatné. To znamená nielen choroboplodné zárodky, ale aj poškodené (zostarnuté, opotrebované, infekciou napadnuté alebo nádorovo zvrhnuté) tkanivá vlastného tela. Napriek tomu, že zrelé pohlavné bunky - spermie u chlapcov a vajíčka u dievčat - sa objavujú v tele až okolo puberty, dlho po ukončení imunologického zrenia, imunitná sústava ich všeobecne vníma ako cudzie a vo vlastnom tele môžu prežiť opäť len vďaka mnohým zvláštnym ochranným opatreniam. Pre úspešné tehotenstvo musí materský organizmus dokázať tolerovať v maternici sa vyvíjajúci plod, ktorý nesie časť otcovských, t.j. cudzorodých antigénov.

Neplodnosť je alarm, že v tele nie je všetko v poriadku. Príčiny neplodnosti môžu byť anatomické, hormonálne, genetické, ale aj imunitné. Poruchy imunitného systému môžu zasiahnuť do reprodukčného procesu na viacerých úrovniach. Môžu negatívne ovplyvniť aktivitu endokrinných žliaz, ktoré sú nutné pre optimálne fungovanie gonád (typickým príkladom je tzv. predčasné ovariálne zlyhanie). Takisto môžu priamo poškodzovať reprodukčné tkanivá ženy aj muža zápalovou reakciou. Abnormálne fungujúci imunitný systém môže zabrániť uhniezdeniu vajíčka a správnemu vývoju placenty. Môže byť príčinou abnormálneho rozpoznávania aloantigénov na bunkách embrya, čo vedie k poškodzujúcej reakcii namierenej proti plodu. Strata plodu môže byť takisto indukovaná negatívnym pôsobením antifosfolipidových protilátok na cievne zásobenie plodu. Na imunologické príčiny neplodnosti treba myslieť v prvom rade u žien trpiacich nejakou autoimunitnou chorobou (systémový lupus erytematodes, juvenilná artritída, niektoré poruchy funkcie štítnej žľazy, niektoré typy cukrovky). Reprodukčná imunológia skúma, v patologickom zmysle slova imunitné reakcie organizmu namierené proti reprodukčným tkanivám, reprodukčným bunkám alebo ich štruktúram, ktoré sa podieľajú nepriamo na procesoch súvisiacich s plodnosťou - s procesom oplodnenia, donosenia a pôrodu živého a zdravého dieťaťa. Vychádza sa z faktu, že plod je tzv. semitransplantát, čo znamená, že polovička buniek je cudzích, dodaných otcom. Imunitný systém funguje na princípe schopnosti rozlišovať vlastné a cudzie. Vlastné toleruje, proti nevlastným reaguje rôznymi mechanizmami. Preto môžeme povedať, že tehotenstvo je imunologicky podmienený stav. Plod sa môže vyvíjať iba vďaka stavu imunosupresie (potlačenie imunitných reakcií), čo nazývame imunologická tolerancia. Imunitný systém v tomto prípade toleruje nevlastné - cudzie. To znamená, že za fyziologických okolností je v priebehu celého tehotenstva znížený počet a funkcia imunokompetentných buniek.

Neplodnosť páru je podľa WHO definovaná ako neschopnosť počať dieťa po 1 roku pravidelného nechráneného sexuálneho styku. Uvádza sa, že v súčasnej dobe sa problematika porúch plodnosti v celosvetovom meradle týka asi 10-15% párov vo fertilnom veku, pre vyspelé krajiny uvádzajú niektorí autori až 20-25%, čo zodpovedá údajom pre SR, kde sa tento problém týka asi každého 5. páru. Trend narastania počtu neplodných párov sa pripisuje jednak genotoxickým faktorom prostredia, stresu, pohlavným chorobám a zápalom v uro-gynekologickej oblasti a takisto aj odsúvaniu gravidity do neskoršieho veku. Jednou z príčin neplodnosti môže byť aj porucha imunitného systému, resp. niektorej z jeho súčastí - priemerne sa uvádza asi 10-15% podiel imunologických faktorov z celkového počtu infertilít „neznámej“ etiológie. Po možných imunologických príčinách neplodnosti je potrebné pátrať po vylúčení iných možných etiologických faktorov, ku ktorým patria faktory anatomické (najmä rôzne vývojové vady pohlavných orgánov), faktory genetické (rôzne abnormality počtu či štruktúry chromozómov), hormonálne (najmä hyperprolaktinémia či hyposekrécia pohlavných hormónov a gonadotropínov, či ochorenia štítnej žľazy) a infekčné (zápaly v urogynekologickej oblasti). K nežiaducej imunitnej reakcii proti zárodku a plodu môže dôjsť vo všetkých fázach tehotenstva, kedy dochádza k imunologicky podmieneným potratom alebo predčasným pôrodom. Každý z týchto problémov môže spôsobiť iný faktor. Preto vyšetrujeme protilátky proti spermiám, vajíčkam a tiež aj bunkovú imunitu. Okrem toho sa vyšetrujú aj protilátky, ktoré nemusia súvisieť len s tehotenstvom, ale práve v tehotenstve spôsobujú ťažkosti. Sem patria napr. U žien s potratmi z imunologických príčin sa biopsiami preukázalo zmnožené množstvo počtu leukocytov - hlavne makrofágov a NK buniek a ich výraznú aktiváciu.

Sú dve možnosti: Imunitu vyliečiť alebo ju obísť. V prípade lokálnej imunity proti spermiám je najjednoduchšie ju obísť a použiť napr. IUI, IVF, ICSI. Tam, kde imunita bráni usadeniu embrya v maternici je potrebné imunitu utlmiť. Kortikoidy (kortikosteroidy) je skupina hormónov, ktoré sa tvoria v kôre nadobličiek. Zasahujú do mnohých fyziologických procesov, ako je imunitný systém, metabolizmus cukrov, rozklad bielkovín, hladinu elektrolytov v krvi a iné. S presným a minimálnym dávkovaním potláčajú nepriaznivú imunitnú odpoveď a umožňujú plodu sa počas tehotenstva vyvíjať. Imunoglobulíny sú bielkoviny, ktoré produkujú B lymfocyty. Infúzie intralipidov - sterilná tuková emulzia obsahuje sójový olej, lecitín a glycerín. Má schopnosť potláčať nadmerne aktivovaný imunitný systém ženy, ktorý útočí na plod. Pri autoimunitnom opakovanom potrácaní vyvolanom antifosfolipidovými a ďalšími prokoagulačnými protilátkami je vyššia tvorba zrazenín v maternici a placente, čo sa prejaví tak, že krvné zrazeniny bránia krvi prúdiť k zárodku a dostatočne ho vyživovať. Metódou liečebnej voľby u týchto žien je podávanie nízkych dávok kyseliny acetylosalicylovej, prípadne s nízkomolekulárnym heparínom. Dôležitý je aj dostatočný prísun vitamínu, ktorý má kľúčový význam pre zdravú mužskú a ženskú reprodukciu.

Nežiaduci účinok lieku je nepriaznivá, nepredvídateľná reakcia na podanie lieku. Môže mať rôzny stupeň závažnosti až trvalé následky na zdraví či dokonca úmrtie. U niektorých liekov je nežiaduci účinok závislý od podanej dávky, inokedy nie. Popri známych a predvídateľných nežiaducich účinkoch sa môžu vyskytnúť aj neočakávané, teda také, ktoré doteraz neboli zaznamenané a teda ich ani nebolo možné predvídať. K nežiaducim účinkom patria aj vplyvy na možnosť počatia, tehotenstvo a vývoj plodu. Výskyt niektorých nežiaducich účinkov môže byť zvýšený kombináciou s inými liekmi. Súhrnne sú nežiaduce účinky liečby registrované u 30-40 % ambulantných pacientov. U 7 % pacientov sú natoľko závažné, že si vyžiadajú hospitalizáciu. U liekov sa nežiaduce účinky môžu vyskytnúť veľmi často (asi u 10 % liečených), často (od 1 do 10 %) alebo menej často (teda pod 1 %) až zriedkavo (pod 0,1 %). Veľmi často sa v prvých týždňoch po nasadení liečby kortikosteroidmi prejavuje vplyv na psychiku. Výnimočne, obvykle u predtým psychiatricky už liečených pacientov, sa môže objaviť depresia. Príznaky však obvykle bývajú opačné, chorí sa cítia plní energie, často potrebujú menej spať. Zákernosť príznakov spočíva v podcenení choroby a precenení fázy uzdravovania i vlastných síl. Pri dlhodobej liečbe kortikosteroidmi má asi 50 % liečených prejavy osteoporózy - oslabenie štruktúry kostí, označované ľudovo ako rednutie kostí. Ku kostným zmenám dochádza aj pri veľmi nízkych dávkach kortikosteroidov, napr. Menej často a zriedkavo sa môže objaviť u kortikosteroidnej terapie sivý očný zákal, závažné je, že častejšie u detských pacientov. Mnohokrát je preceňované riziko vzniku žalúdočných a dvanástnikových vredov. Nebezpečenstvo ich vzniku však prudko rastie, ak pacient kombinuje kortikosteroidy s tzv. nesteroidnými antireumatikami. Menej často môže viesť kortikosteroidná liečba k vzniku cukrovky, pričom riziko rastie s dávkou. Ohrození sú predovšetkým ľudia, ktorí majú k cukrovke predispozíciu, starí, chorí ľudia a pacienti, u ktorých bola slabá cukrovka síce už prítomná, ale nebola pred liečbou kortikosteroidmi odhalená. Riziko zníženej funkcie nadobličiek U pacientov liečených kortikosteroidmi dochádza k potlačeniu osi podmozgová žľaza - nadobličky. To vedie k zníženej tvorbe prirodzených kortikosteroidných hormónov kôry nadobličiek. Potlačenie ich tvorby pretrváva rôzne dlho ešte po vysadení kortikosteroidnej liečby a do značnej miery závisí od trvania liečby a dávky.

Na základe aktuálnych poznatkov v oblasti reprodukčnej imunológie je zjavné, že imunopatologické mechanizmy môžu mať pomerne významný podiel na znížení reprodukčných schopností človeka. Preto má využitie dostupných diagnostických metód a následné liečebné ovplyvnenie funkcií nesprávne fungujúceho imunitného systému v starostlivosti o neplodné páry dôležité miesto. Výber jednotlivých vyšetrovacích metód u pacientov s reprodukčnými problémami, u ktorých boli predchádzajúcimi vyšetreniami vylúčené iné bežnejšie príčiny ostáva aj naďalej na ošetrujúcom lekárovi- špecialistovi a mal by sa opierať o individuálne potreby konkrétneho pacienta, resp.

Ako sa pripraviť na IVF?

Okrem imunologického vyšetrenia je dôležité dodržiavať aj ďalšie odporúčania, ktoré môžu zvýšiť šance na úspešné otehotnenie:

• Zmena životného štýlu: Odporúča sa zmeniť životný štýl, ak ste to ešte neurobili pred prvým cyklom mimotelového oplodnenia. Režimové opatrenia v zmysle zmeny životného štýlu a úpravy hmotnosti je potrebné urobiť oveľa skôr, ako vstúpite do IVF cyklu, aby mali čas prejaviť sa na kvalite spermií/prípadne na odpovedi na stimuláciu vaječníkov.
• Vitamíny a doplnky: Štandardne odporúčame komplexné prenatálne vitamíny, je dobré s nimi začať aspoň mesiac pred začiatkom stimulácie. Niekoľko mesiacov pred IVF cyklom je vhodné užívať kyselinu listovú. Vitamínové preparáty môžu pomôcť upraviť aj kvalitu spermií u partnera, tiež ich je však potrebné užívať aspoň 2 mesiace pred IVF cyklom. Pri nízkych koncentráciách v krvi, a predovšetkým v zimných mesiacoch, treba užívať aj vitamín D. Veľmi dôležitý je aj dostatok spánku. Niekedy sa pred IVF cyklom odporúča aj užívanie melatonínu v dávke 2 mg večer.
• Pohlavný styk a alkohol: Ku koncu stimulácie, 5 - 6 dní pred odberom vajíčok a niekoľko dní po odbere vajíčok, už pohlavný styk s ejakuláciou do pošvy nie je vhodný. Primerané pitie alkoholu počas hormonálnej stimulácie nezakazujeme. Mierne užívanie môže dokonca znížiť stres spojený s liečbou neplodnosti. Samozrejme, akýkoľvek exces je nevhodný. Miera platí aj pri káve.
• Čoho sa vyvarovať: Pri hormonálnej liečbe nie je vhodné slnenie ani solárium. Rovnako, ku koncu stimulácie a tesne po embryotransfere neodporúčame sauny a horúce kúpele. Fajčenie nie je vhodné. Ani u muža, ani u ženy. Samozrejme, je vhodné vyhýbať sa ľuďom s akútnym infekčným ochorením.
• Psychická pohoda: Čakanie na výsledok liečby neplodnosti je najstresujúcejším obdobím celého IVF cyklu, lebo sa vlastne nič nedeje. Preto je vhodné si tento čas vyplniť a čo najviac sa vyhýbať stresu.

Príprava na imunologické vyšetrenie

Pred imunologickým vyšetrením krvi je dôležité dodržiavať pokyny lekára. Zvyčajne sa odporúča dostatočný príjem tekutín, aby sa predišlo príliš hustej krvi pri odbere viacerých ampuliek krvi. V deň odberu je vhodné piť dostatočné množstvo vody. Samotný proces odberu krvi je rýchly a zvyčajne netrvá dlho. Po odobratí krvi nasleduje konzultácia s lekárom, ktorý zhodnotí výsledky a navrhne ďalší postup.

V prípade, že ste objednaní na imunologické vyšetrenie s partnerom, je bežné, že obaja absolvujete odber krvi. Muž môže byť požiadaný aj o odovzdanie vzorky ejakulátu. Lekár sa bude pýtať na rodinnú anamnézu a študovať predchádzajúce výsledky vyšetrení. Dôležité je informovať lekára o všetkých relevantných zdravotných informáciách.

tags: #vysetrenie #krv #ivf #imuno